ZEISS,特殊螢光影像系統,TIRF Microscope 全內反射螢光顯微鏡


		*整合性、安全性最高的* *Zeiss TIRF Microscope* *全內反射螢* *光影像系統*

產品特點
‧ 標準配置一支多波長(458, 488, 514 nm)Argon雷射，可選擇25mW或100mW。也可自行選擇其他波

長之雷射。
‧ 雷射由顯微鏡側方之螢光視野光圈位置導入，操作方便。切換光源只需按Shutter鍵，即可切換到

穿透光亮場模式及傳統螢光模式，操作快速便利且易學。
‧ 超高數值孔徑的α Plan-Fluar 100X/NA1.45物鏡，不需使用具毒性之浸油及昂貴的藍寶石材質

(sapphire)蓋玻片。
‧ 雷射保護裝置與電動式雷射光路快門聯控，提供使用者一個安全免受雷射傷害之操作環境。
‧ 各種具雷射安全設計之培養箱，可搭配細胞培養環境控制裝置，並可做穿透光擷取，應用範圍更

廣。

產品說明
TIRF為加強顯微螢光影像Z軸向解析度之一種光學技術，此技術最適用於觀察貼近蓋玻片表面區域之螢光樣本，如觀察細胞膜相關之生理作用，及活體外單分子交互作用之研究等。由於此類樣本所需觀察的Z軸範圍僅約100 nm厚，極易受離蓋玻片表面較遠區域所產生之螢光訊號干擾，影響觀察範圍的影像清晰度。而TIRF可以完全克服此一困擾研究人員已久的問題，提供超高解析度及超高信號對雜訊比(S/N ratio)的螢光圖像。

	原理說明 TIRF(Total Internal Reflection Fluorescence)乃利用物理光學之全內反射原理，使用可調整入射角度之雷射光源，配合高孔徑值之物鏡，使雷射光由物鏡入射至樣本時，在蓋玻片與樣本介質(主要為水溶液)之交界面，產生光學全內反射現象。此現象使光源不至於穿透交界面而激發整體樣本，只有距蓋玻片表面厚度不到200 nm的範圍內之區域為受激發範圍，且受激強度隨著與蓋玻片表面之距離呈等比級數下降。
效益說明因受激發的範圍大量減少，此技術可避免非焦面之樣本產生發散螢光，故能解決非焦面螢光雜光之問題，達到光學切片之清晰化效果。


創新設計 TIRF技術之研發由來已久，早在1981即有第一篇相關論文發表。經多年發展，在雷射導引光路設計、雷射角度調整、物鏡N.A.值、適用之浸油及蓋玻片等各方面均不斷改良。Carl Zeiss亦於2005年推出創新研發設計的TIRF 全內反射螢光影像系統，包含以下配件：
	多波長(458, 488, 514 nm)Argon雷射：Argon雷射由光纖管導引至TIRF Slider，可選擇25mW或100mW。使用者亦可自備其他波長之雷射管。
	TIRF Slider：創新之TIRF光路設計，將雷射由顯微鏡側方之螢光視野光圈位置導入，避免傳統由顯微鏡後方之螢光光源位置導入所產生的諸多操作及調整不便問題。其特殊之Polar Cube設計，可允許100%雷射光反射及50%傳統螢光穿透，切換兩種光源只需切按Shutter，完全不需調整其他Filter Wheel，操作快速便利且易學。依使用者需要可再搭配8段減光片轉輪及快速Shutter，使TIRF應用可擴展至TimeLapse實驗。
	α Plan-Fluar 100X/1.45物鏡：超高N.A.提供足夠之入射角達到全內反射的效果，且不需使用具毒性之浸油及昂貴的sapphire蓋玻片。
	雷射保護裝置：獨創設計，電動式雷射shutter聯控，避免使用者在任何可能狀態下直視雷射光源，提供使用者一個安全免受雷射傷害之操作環境。可選擇Safety Cover或Safety Incubator，後者可搭配細胞培養環控裝置，並可做穿透光擷取，應用範圍更廣。

Zeiss TIRF solution可裝置於Zeiss全新研究級倒立螢光顯微鏡Axio Observer，原有機身亦可改裝升級。其應用範圍如下： →Cell Biology (Cell Physiology / Neurobiology / Neurophysiology): ‧ Membrane surfaces: interaction cell surface – environment ‧ Exocytosis- Endocytosis ‧ Cell-substrate-contacts, transmembrane ion currents ‧ Localisation and trafficking of membrane associated molecules ‧ Membrane penetration of virus particles into the cell ‧ Docking of vesicles to cell membrane ‧ Proteines into the cell membrane ‧ Interaction of the cytoskeleton with cell membrane → Molecular Biology / Developmental Biology / Biochemistry ‧ Single molecule , i.e. Myosin-ATP interaction, proteine-membrane interaction ‧ Protein-protein-interactions, gene expression analysis ‧ Protein-trafficking

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